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企業展示補體系統有三條主要途徑可以啟動補體級聯反應：經典途徑、旁路途徑和凝集素途徑，1. 經典途徑（Classic Pathway），從C1q-C1r2-C1s2開始，抗原-抗體復合物為主要激活物；2.旁路途徑（Alternative Pathway），從C3開始，其不依賴于抗體；3.凝集素激活途徑（MBL Pathway），通過甘露聚糖結合凝集素（Mannan Binding Lectin, MBL）糖基識別。上述3條途徑具有共同的末端通路，即膜攻擊復合物的形成及其溶解細胞效應。
圖1 補體激活的3條途徑
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補體系統概況
補體系統是先天免疫的重要組成部分，其異常激活或調控失衡可導致多種自身免疫性疾病和罕見病。有明確補體致病機制的疾病有陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥、非典型溶血性尿毒癥綜合征、干性年齡相關性黃斑變性等。截至 2025年，全球已獲批上市的靶向補體系統的藥物主要包括以下幾類：單克隆抗體、小分子拮抗劑、肽類抑制劑和RNA適配體，這些藥物主要作用于補體通路中的關鍵節點，如C3、C5、Factor B、MASP-2 等。
相較于上述藥物類型，小核酸藥物可通過靶向 mRNA 實現對補體關鍵因子（如 C3、C5、Factor B等）的源頭性、持久性沉默，具有給藥頻率低、組織分布可控、可靶向“不可成藥”蛋白等獨特優勢，正在成為補體靶向治療領域極具潛力的新方向。雖然目前尚無靶向補體系統的 ASO 或 siRNA 藥物獲批上市，但全球已有多個候選藥處于臨床開發中。
在這一背景下，如何建立科學可靠的小核酸藥物藥效評價體系，成為推動該領域臨床轉化的關鍵。有濟醫藥藥效團隊在小核酸靶向補體藥效評價中積累了豐富經驗，本文將結合團隊經驗圍繞小核酸藥物在C3、C5、CFB靶點的藥效評價關鍵指標展開介紹。
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小核酸靶向補體藥效作用評價策略
PCC階段，采用人源化小鼠，考察藥物降低靶蛋白、敲降靶基因水平，起效時間，藥效持續時間，起效劑量等指標，確認候選化合物。
IND階段，采用食蟹猴進一步考察藥物對靶蛋白降低水平、靶基因的敲降等藥效作用，同時考察藥物劑量相關性，持續作用時間，為臨床研究提供依據。
1.小核酸藥物對hC3小鼠及食蟹猴藥效作用研究
采用hC3小鼠，通過單次皮下注射給予小核酸藥物，藥后7 d小鼠血清中hC3蛋白水平顯著下降（P<0.001），并可維持到藥后28 d。隨著小鼠周齡增加，生理鹽水組hC3小鼠體重增長緩慢；給藥組小鼠體重呈穩定增長態勢，在試驗終點與生理鹽水組小鼠相比體重顯著增加（P<0.05）。需要注意的是，hC3小鼠自身會有一定死亡率，在14周齡時生存率約為50%，因此在開展試驗時盡量選擇在小鼠6周齡時開始給藥，最長可觀察至小鼠給藥后5周。
食蟹猴單次皮下注射小核酸藥物后，每7 d采血檢測猴血清中C3蛋白水平，并在藥后28 d進行肝臟穿刺，檢測肝臟組織中C3 mRNA水平。結果顯示，給予小核酸藥物后C3蛋白水平及mRNA水平均極顯著下降，并可維持較長時間，如圖2。
圖2 小核酸藥物對hC3小鼠及食蟹猴藥效作用研究
2.小核酸藥物對hC5小鼠及食蟹猴藥效作用研究
與hC3小鼠相比，hC5小鼠死亡率很低，從小鼠6周齡開始給藥后可觀察較長時間。向hC5小鼠單次皮下注射小核酸藥物后，小鼠血清中hC5蛋白水平顯著下降（P<0.001），抑制率最高可達99%，其藥效作用可在藥后35 d內呈穩定趨勢，隨后小幅度緩慢回升。
向食蟹猴單次皮下注射小核酸藥物后，結果顯示C5蛋白水平及mRNA水平均極顯著下降（P<0.001），抑制率最高可達95%，如圖3。
圖3 小核酸藥物對hC5小鼠及食蟹猴藥效作用研究
3.核酸藥物對hCFB小鼠及食蟹猴藥效作用研究
hCFB小鼠與hC3小鼠一樣，隨著周齡增長，自身會有一定死亡率。因此在開展試驗時盡量選擇在小鼠6周齡時開始給藥。
通過向hCFB小鼠單次皮下注射小核酸藥物發現，藥后7 d小鼠血清中hCFB蛋白水平顯著下降（P<0.001），并可維持到藥后49d。
食蟹猴單次皮下注射小核酸藥物后，每7 d采血檢測猴血清中CFB蛋白水平，并在藥后35 d進行肝臟穿刺，檢測肝臟組織中CFB mRNA水平。結果顯示，給予小核酸藥物后CFB蛋白水平及mRNA水平均極顯著下降，并可維持較長時間，如圖4。
圖4 小核酸藥物對hCFB小鼠及食蟹猴藥效作用研究
在檢測完小核酸藥物對靶蛋白和靶基因的藥效作用后，還需要對補體系統疾病的藥效指標進行檢測，主要的檢測指標包括：CH50、AH50、CCP、CAP。
4.CH50、AH50活性檢測
補體 CH50 和 AH50 活性檢測是評估補體系統整體功能的經典功能性實驗，它們分別反映經典途徑（Classical Pathway）和旁路途徑（Alternative Pathway）的完整性。在補體靶向藥物開發中，CH50 和 AH50是關鍵藥效學生物標志物，用于確認通路抑制程度，經典途徑法(CH50)是基于在Ca2+和Mg2+存在下裂解致敏綿羊紅細胞。旁路途徑法(AH50)是基于在Mg2+存在下裂解兔紅細胞。C5靶點抑制劑主要通過經典途徑作用，降低CH50活性，CFB靶點抑制劑主要通過旁路途徑作用，降低AH50活性。C3靶點抑制劑可降低CH50活性及AH50活性，但降低AH50活性程度更強。如圖5。
圖5 CH50、AH50活性檢測
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結語
目前在臨床階段的部分小核酸藥物已在 IgA 腎病、年齡相關性黃斑變性等補體驅動疾病中顯示出顯著降低蛋白尿或延緩視網膜病變進展的潛力。隨著遞送技術（如肝外靶向、腎臟/眼部局部遞送）和化學修飾（提高穩定性、降低免疫原性）的持續突破，小核酸藥物有望從當前以肝臟為靶器官的局限中拓展至更廣泛的補體介導疾病場景，包括 C3 腎小球病、非典型溶血性尿毒癥綜合征（aHUS）等。未來，結合精準生物標志物指導的個體化治療，小核酸療法或將為補體相關罕見病和自身免疫病提供高效、安全且長期可控的新一代治療選擇。
經過多年深耕，有濟醫藥小核酸藥效團隊已經積累了豐富的項目經驗。目前，團隊已成功開展了20多個靶點的藥效學研究工作，并將其中6款產品順利推動進入臨床階段。我們期待與更多創新藥企及科研機構攜手，共同推進靶向補體系統的小核酸藥物研發，加速候選分子從藥效驗證到臨床申報的進程，助力突破性療法早日惠及患者。
